张女士香港验血分享

张女士和她的老公胡是大学同学,结业后两人成婚.可是为了各自的工作,也因为在其他当地的联系,一向没有孩子.直到本年5月,张女士才发现自己怀孕了,但这个孩子是在安全期间怀孕的.

将含有管的EDTA离心机3008搜集在母体血液样品(10mL)中并在3小时内别离.将血浆转移到一般的聚丙烯管中并经过离心3008搜集在新管中.

依据"Blood and?What?The humoral protocol"

运用的1.5ml DNA稍微修正QIAamp血液微型试剂盒(Qiagen)用于血浆样品提取.

运用50微升水从柱上洗脱DNA.

虽然香港卓信研究人员报导了运用ABI PRISM 7700序列剖析仪(Applied Biosystems)对母体血浆进行DNA剖析,但咱们运用LightCycler(Roche Diagnostics),这是一种牢靠的DNA定量办法.在Y染色体特异性序列中,DYS-14,雄性胎儿胎儿细胞的DNA用作量化的分子符号.

在PCR反响系统中,扩增引物DYS 14-713F(5'-CAT CCA CGT CCC和DYS14-880R(5'-TTC CCC TTT GTT GTT葡萄糖耐量实验,看CCC CAA和双标荧光探针DYS14-) 883T(5'-FAM-CGA AGC CGA GCT GCC CAT CA-TAMRA-3').

光致发光PCR反响依据制造商的20微升反响体积和DNA站主荧光探针的一切组分和从试剂组取得的扩增引物的描绘制备杂交探针.罗氏确诊).提取的血浆DNA(13.1微升)用作每个反响的模板.在热循环开始时,变性在95℃下进行10分钟,然后变性40个循环,在95℃变性10秒,退火57 [度]进行20秒并在72℃下延伸20秒.血浆样品中存在的DNA拷贝数由所用雄性基因组DNA的校准稀释曲线确认.

提取血液以查看胎儿性别,因为胎儿DNA和母体血浆中存在很多母体DNA,一般剖析来自亲本的胎儿核苷酸序列不同于母体.雄性胎儿DNA具有Y染色体特异性序列.香港卓信研究人员现在运用荧光定量PCR技能检测Y染色体上的特定基因,如SRY基因.假如检测到SRY基因,则意味着胎儿是男孩,不然它是女孩.